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塑料培養(yǎng)皿的應(yīng)用
20世紀(jì)60年代,Friedenstein等[1]發(fā)現(xiàn),在塑料培養(yǎng)皿中培養(yǎng)的貼壁非造血骨髓單核細(xì)胞在一定條件下可分化為成骨細(xì)胞、成軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和成肌細(xì)胞,而且這些細(xì)胞經(jīng)過(guò)20~30個(gè)培養(yǎng)周期,仍能保持多向分化潛能。這些細(xì)胞就是近幾年來(lái)在細(xì)胞領(lǐng)域一直倍受關(guān)注的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞((骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,MSCs)。由于MSCs具有自我更新、分化增殖和多向分化潛能的特點(diǎn)[2],MSCs作為一種重要的載體細(xì)胞在基因治療中越來(lái)越引起人們的關(guān)注,成為近年來(lái)國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn),本文就目前MSCs在基因治療中的應(yīng)用研究進(jìn)行綜述。1MSCs的分離培養(yǎng)目前用于分離MSCs的方法主要有4種:密度梯度離心法、貼壁篩選法、流式細(xì)胞儀分選法和免疫磁珠法。Hung等[3]報(bào)道Percoll分離液密度梯度離心法的MSCs獲得率很低;而免疫磁珠分選法針對(duì)MSCs特異性表面抗原,費(fèi)用昂貴,操作復(fù)雜,分選難度大;流式細(xì)胞儀分選法的共聚焦激光對(duì)細(xì)胞的活性有毒害作用。目前應(yīng)用比較廣泛的是貼壁篩選法結(jié)合密度梯度離心法,效果相對(duì)較好,但是具體選擇何種方法還要依賴(lài)于實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蜅l件。MSCs一般取自于動(dòng)物的股骨、脛骨,培養(yǎng)MSCs時(shí)
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