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1.收集血液
皮膚穿刺（ 圖1A ）
戴上一副一次性乳膠橡膠手套。在皮膚穿刺之前，患者應該溫暖他/她的手。手指按順序進行按摩，使血液流向穿刺部位。用合適的消毒劑（ 例如 70％異丙醇）清潔非書寫手的第三或第四手指，手指的尖端遠節(jié)點的手掌側的皮膚，用 一次性安全采血針刺破皮膚。手指應保持在重力有利于指尖上的血液收集的位置。當通過皮膚穿刺收集毛細血管血液完成時，在指尖上放置繃帶。
2.血斑的準備
通過皮膚穿刺收集的血液制備（ 圖1B和1C ），用紗布墊擦去第一滴血，因為它可能含有多余的組織液。再次按摩手指以增加穿刺部位的血流量。將下一個血滴轉移到過濾卡的一個圓圈上，不要直接用指尖接觸表面。僅通過毛細作用力將血液浸入過濾器的質地中。讓指尖上的下一大滴毛細血管血液在下一個圓圈中收集。繼續(xù)此過程，直到所有必要的圓圈都被填滿或血流停止。如果血流量不足以填充過濾卡所需的所有圓圈，請勿過度擠壓或“擠”手指。 如果血流停止，則在指尖上放置繃帶。 如果檢查需要更多血液，則在另一根手指上進行第二次皮膚穿刺。
3.血液干燥
為了干燥血斑，將濾紙放在生物危害安全柜中的干凈紙巾上，讓它們在沒有任何外部熱源的情況下在室溫下干燥，優(yōu)選O / N（但至少4小時）。當干燥過程完成時，血斑具有均勻的深褐色，并且不再可見紅色區(qū)域（ 圖1D ）
4.干血點的儲存和運輸（DBS）
注意：干燥后可以中斷血斑的處理。采血卡現(xiàn)在可以存儲，儲存時，將濾紙卡放入一個不透氣的血樣袋中，該袋包含1到2個干燥劑袋，以保護樣品免受潮濕（ 圖1E ）。（可選）添加濕度指示卡。將此袋盡快轉移到溫度為-20°C或更低的冰箱中。如果在現(xiàn)場條件下無法使用冷凍機，則可在-4°C或甚至在環(huán)境溫度下儲存長達14天。在干冰上運輸冷凍DBS標本。對于最初保持在環(huán)境溫度的采血卡，使用三重包裝系統(tǒng)，其由作為內部容器的拉鏈袋以及內部和外部封套組成。外包裝上不需要通過普通郵件裝運內容標記，但必須將國際生物危害標志貼在主容器上 。如果干燥劑包和/或附加濕度指示卡變?yōu)榉奂t色，則排除過濾卡進一步處理。
5.干血斑的洗脫
使用一次性使用的6毫米設備從903級采血卡的每個血液浸泡的圓圈中打出一個點（ 圖1F）。將所有穿孔的干血斑從單個患者轉移到12孔板的一個孔中。用含有0.05％吐溫20和0.08％疊氮化鈉的磷酸鹽緩沖鹽水填充孔（ 圖1G ）。使添加的緩沖液的體積適應用于隨后分析干血斑洗脫液的測定的最小相應要求。重復這些步驟以獲得第二系列干血斑洗脫液以進行分子分析。
將細胞培養(yǎng)板置于實驗室振蕩器上，讓打孔干燥的血斑輕輕洗脫至少4小時，或優(yōu)選O / N（ 圖1H ）。
第二天，斑點幾乎沒有血液并且已形成溶血上清液（ 圖1I ）。將這些洗脫液轉移到微量離心管中。然后，使它們以10,500×g離心2分鐘（ 圖1J ）以從洗脫期間形成的任何碎片中釋放上清液（ 圖1K ）。
6.洗脫液分析
離心洗脫液現(xiàn)在可以用于預期的分析。使用市售試劑盒研究乙型肝炎病毒，丙型肝炎病毒和HIV感染標志物的洗脫液，并仔細遵循各自制造商的說明（ 圖1L ）。
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